Robert Neville (Will Smith) ist ein brillanter Wissenschaftler, aber selbst er konnte das schreckliche Virus nicht eindämmen, das unaufhaltsam, unheilbar und vom Menschen geschaffen gewütet hat. Neville, der selbst immun zu sein scheint, ist nun der letzte menschliche Überlebende in den Ruinen von New York und vielleicht auf der ganzen Welt. Drei Jahre lang sendet Neville täglich Funksprüche aus, verzweifelt auf der Suche nach weiteren Überlebenden, die sich noch irgendwo aufhalten könnten. Doch er ist nicht allein. Mutierte Opfer der Seuche – die Infizierten – lauern in den Schatten, beobachten ihn und warten auf einen fatalen Fehler. Neville, der vielleicht die letzte Hoffnung der Menschheit ist, wird nur von seiner Mission angetrieben: einen Weg zu finden, die Auswirkungen des Virus mithilfe seines eigenen Immunbluts umzukehren. Aber er weiß, dass er zahlenmäßig unterlegen ist … und ihm die Zeit davonläuft.